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アプリケーション・データ
 Bio-Rad 「Quick Start プロテインアッセイキット」のプレートリーダーを用いた測定方法 
1.準備
  • Bio-Rad社製「Quick Start プロテインアッセイキット2」
      (染色液1L×1、Quick Start BSA スタンダード 2ml(0.125、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2mg/ml)×2本)
  • プレートリーダー(SH-1300)
  • マイクロプレート(greiner 透明96穴プレート)
  • 分注器(5μl、200μlが分注できるピペット)
  • プレートミキサー(BioTec)
2.分注量・分注ポジション
スタンダード5µl
染色液250µl
255µl
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A 染色液 染色液 染色液 染色液 染色液 染色液 染色液 染色液 染色液 染色液 染色液 染色液
B 125 125 125 125 125 125 125 125 125 125 125 125
C 250 250 250 250 250 250 250 250 250 250 250 250
D 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500
E 750 750 750 750 750 750 750 750 750 750 750 750
F 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000
G 1500 1500 1500 1500 1500 1500 1500 1500 1500 1500 1500 1500
H 2000 2000 2000 2000 2000 2000 2000 2000 2000 2000 2000 2000
3.試薬準備・測定手順
  • 試料を常温に戻す。転倒混和する。
  • ウェルにスタンダードをそれぞれ5µlずつ分注する。
  • スタンダードを分注したウェルに染色液を250µlずつ分注する。
  • プレートミキサーを用いてプレートを1分間攪拌する。
  • 室温で5分間インキュベートする。
  • プレートリーダーにプレートをセットし、595nmで測定する。
  • 結果より検量線を作成する。
4.準備
測定方式吸光度
測定法エンドポイント
波長595nm
プレートSBS規格 96ウェル
フラッシュ回数10回
ミキシングOFF
測定方向→←
プレート移動スピード標準
5.測定結果
SH-1300で測定
試料濃度
(μg/ml)
平均
(Abs)
A 0 0.372
B 125 0.501
C 250 0.609
D 500 0.805
E 750 0.977
F 1000 1.204
G 1500 1.366
H 2000 1.489
※試薬の線形範囲が125〜1500μg/ml のため2000μg/ml のデータは除外
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